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细胞复苏状态不佳,尊龙凯时人生就博教你如何调整

发布时间:2025-02-13   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞复苏后状态不佳该如何调整?在细胞复苏后,可能会出现状态不理想的情况,以下是一些常见原因及相应的解决方法,帮助您及时调整。

细胞复苏状态不佳,尊龙凯时人生就博教你如何调整

1. 细胞冻存不当

解决方法:您可以尝试调整细胞状态,增加血清的比例,然后在后续传代中进一步调整,以改善细胞的复苏效果。

2. 自行制备的冻存细胞无活性

解决方法:在制备冻存细胞时,确保使用传代次数少且处于对数期的细胞,此外,提高冻存密度有助于提升复苏存活率,推荐密度为100~300万细胞/mL。

3. 细胞复苏方法不当

解决方法:在复苏时,强调“快融”,越快融化,细胞所受的损伤越小。确保冷冻细胞能够迅速解冻,并在接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

4. 复苏培养基使用不当

解决方法:确保培养基在使用前已经预热,并尽快移除含有冷冻保护剂的培养基,以防止细胞活力下降。

5. 处理细胞时动作不够轻柔

解决方法:冻存和复苏过程对大多数细胞都有不利影响,避免通过涡旋振荡或用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),也不要高速离心细胞。

6. 细胞稀释过度

解决方法:将解冻后的细胞以高密度接种,以改善复苏效果。

7. 冻存液中所用保护剂未避光存储

解决方法:如果冻存保护剂未避光储存,可能会转变为对细胞有毒的物质;建议重新取一只冻存保护剂,进行细胞的重新冻存。

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