动物模型是医学研究者精心构建的生命载体，旨在模拟人类疾病的表现，精准再现疾病的复杂进程与关键特征。它们主要用于实验生理学、实验病理学和新药筛选等领域。常见的动物模型包括EAE模型、糖尿病模型、肠炎模型、帕金森模型以及阿尔茨海默病模型等。其中，实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是多发性硬化症（MS）最常用的动物模型，其具备多种临床和病理生理特征，体现了人类MS的多样性特点。

主动诱导的EAE小鼠模型以其易于诱导、结果稳健和可复制性强而受到青睐，尤其适合用于转基因小鼠研究药物或特定基因对自身免疫性神经炎症的影响。在实验中，通过皮下注射中枢神经系统匀浆或髓鞘蛋白肽以诱导免疫反应。由于这些肽的免疫原性较低，强效佐剂的使用则显得尤为重要。EAE模型的成功诱导依赖于所选抗原和小鼠品系的共同作用，C57BL/6小鼠通常是转基因研究中使用最多的品系。

在EAE造模过程中，有几个关键步骤需要注意：

一、EAE造模方法

1. 实验动物：选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。

2. 动物适应：在实验环境中适应1周，保持稳定的温度、湿度和光照条件，并确保小鼠能够自由获取食物和水。

3. EAE模型建立：

(1) MOG(35-55)溶液配制：将MOG(35-55)多肽充分溶解于预冷的无菌PBS中，浓度为20mg/mL。

(2) 完全弗氏佐剂（CFA）溶液配制：将热灭活的结核杆菌H37Ra悬浮在CFA或弗氏不完全佐剂中，终浓度达到80mg/mL。

注意：操作时应避免与皮肤和眼睛接触，并严格遵守实验室安全规范。

(3) 抗原乳液制备：按照1:1的体积比将MOG(35-55)多肽溶液与CFA混合，通过三通连接两支注射器进行乳化。

(4) 制备PTX溶液并进行小鼠麻醉。

(5) 进行EAE模型的注射和后续处理。

二、EAE模型监测

每日监测EAE小鼠的体重和临床评分，务必记录体重变化和EAE症状的发生情况。使用标准化评分系统评估临床表现，包括尾部无力、四肢瘫痪等情况。同时，建议进行行为学检测和组织病理学验证，以全面评估模型的成功率。

三、模型成功标准

基本标准为发病率达到80%（临床评分≥2）且病理确认。更高级的标准包括行为学异常和分子标志物的显著变化。

四、EAE造模无症状原因分析

在模型建立过程中，常见问题及其解决方案包括：注射部位形成硬结可能由于乳化不充分，注射技术不当等。通过技术调整和充分乳化来提高模型成功率。

五、EAE动物模型的应用案例

例如，通过PTX构建C57BL/6小鼠EAE模型成功揭示了SPAK信号在MS病理中的作用，这为相关药物的临床前研究提供了有力证据。

在生物医学研究中，动物模型的成功应用为新药研发和疾病机制研究提供了重要基础。我们期待通过更深入的研究，帮助改善患者的健康状况，正如尊龙凯时人生就博所倡导的那样，为健康事业贡献力量。